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PCR實驗室設計基本要求

發(fā)布時間2022-10-28 07:13:09人氣:3879


PCR實驗(experiment)室設計基本要求
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PCR 實驗(experiment)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產(chǎn)物分析(Analyse)等三或四個區(qū)域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室,有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應完全獨立分隔,不應有任何的空氣直通。
2標準的PCR實驗(experiment)室產(chǎn)物分析(Analyse)區(qū)或三個區(qū)域的最后一個區(qū)域(即擴增及產(chǎn)物分析(Analyse)區(qū)),空氣流向應由室外向室內,可通過在室內設置通風櫥、排風扇或其他排風系統(tǒng)達到空氣流由室外向室內流動的要求。
PCR實驗(experiment)室根據(jù)使用儀器(appliance)的功能合理設置各個工作區(qū)域,如采用聚合酶(Enzyme)聯(lián)反應:則設置試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析(Analyse)區(qū)四個單獨的工作區(qū)域,這是最常用的分區(qū)方式。潔凈實驗室無菌試驗室、生物安全實驗室必須保證人身安全、環(huán)境安全、廢棄物安全和樣本安全,能長期而安全地運行,同時還為需要實驗室工作人員提供一個舒適、而良好的工作環(huán)境。樣品需要粉碎處理的,還需增設樣品粉碎區(qū);若使用實時熒光PCR法:基因擴增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個房間內;采用標本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的全自動化PCR分析儀,則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個區(qū)域,因此PCR實驗室原則上設置五個區(qū)或四個區(qū)或三個區(qū)或二個單獨的工作區(qū)。
核酸擴增前區(qū)和核酸擴增后區(qū)可設在一個房間內,但必須在滿足下列要求的前提下:
a.核酸擴增前區(qū)實驗(experiment)室內設置兩個不同位置(position )的實驗區(qū),試劑配置(deploy)在超凈工作臺中操作,樣品處理在生物安全柜內操作。
b.在核酸擴增后區(qū)使用全封閉的擴增和檢測系統(tǒng),如實時熒光PCR儀等。潔凈實驗室無菌試驗室、生物安全實驗室必須保證人身安全、環(huán)境安全、廢棄物安全和樣本安全,能長期而安全地運行,同時還為需要實驗室工作人員提供一個舒適、而良好的工作環(huán)境。
c.每個實驗(experiment)人員使用各自的試劑、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
d.在實驗(experiment)前后對操作區(qū)域和共享器具進行清潔及消毒。凈化實驗室必須控制實驗室的潔凈度,對新風進行過濾,使實驗室達到一定的凈化要求。其中排風系統(tǒng)是重點,對于保證實驗室相對負壓環(huán)境和有效過濾室內污染排風起著重要的作用。
e.各區(qū)域的試劑、器具、儀器(appliance)和設備為該區(qū)專用,不得交叉使用。

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